一、样品前处理&核酸提取方案
按相关标准要求采集样品(如动物全血、血清、病科组织等)。短期样品可存放在-20℃,长期保存可存放于-80℃(不能超过6个月)。
按《非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒说明书》处理样品,该试剂盒采用离心柱方法提取核酸,只需配备迷你离心机,无需配备核酸提取仪。
对于需要研磨的组织样品,可用一次性塑料研磨棒代替研磨器、组织匀浆机或研钵来研磨。优点是无需重复清洗和消毒研磨容器,降低样品间交叉污染的可能性。
<一次性塑料研磨棒>
该样品前处理和核酸提取方案,无需购买昂贵的自动化核酸提取设备及研磨器或组织匀浆机 ,降低了用户检测ASFV的门槛和成本。
二、准确&快速的检测平台
根据日常待检样品的数量,用户可选择便携式荧光定量PCR仪【GH-Q32B型】
GH-Q32B为16孔双通道设计,适合小型养殖基地及屠宰场。无需电脑、直出结果。所有样品孔荧光检测同时进行,无边缘效应。光学系统固态设计,无运动部件。设计精巧,审美在线,便于携带。
三、优中选优的耗材
我们选择高质量的白色反应管来保证检测结果的灵敏度和一致性,可获得比透明管更佳的检测效果(见下图)。
实验效果图
荧光定量PCR专用白管/光学平盖
四、检测非洲猪瘟仪器&耗材清单
非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒(农业部第一批推荐的双百产品) |
郑州中道生物技术有限公司 |
便携式荧光定量PCR仪GH-Q32A型 (单通道) |
上海净浩仪器有限公司 |
便携式荧光定量PCR仪GH-Q32B型 (双通道) |
上海净浩仪器有限公司 |
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0.1ml PCR 8联管 + 光学平盖 (随机附送50条) |
上海净浩仪器有限公司 |
天平(百分之一电子天平) |
一台 |
迷你离心机CK-6 |
一台 |
涡旋振荡器 |
一台 |
冰箱(4℃/-20℃直冷不带自动除霜功能) |
一台 |
低温冰柜(-20℃或以下) |
一台 |
可调移液器(10μl、200μl、1000μl) |
各一支 |
组织研磨仪 |
一台(可选) |
台式高速离心机(12000g以上) |
一台 |
干式恒温器 |
一台(可选,取决于所用核酸提取试剂盒的要求) |
定时器 |
一台 |
电脑 (Win7或Win10系统,4G或以上内存,带网线接口) |
一台 |
喷墨打印机 |
(可选,用于打印报告) |
1.5ml/2ml 无核酸酶的离心管 |
若干 |
5ml/10ml 无核酸酶的采血管 |
若干 |
0.5ml/1.5ml/2ml双面离心管架 |
一套 |
0.1ml/0.2ml 96孔离心管盒 |
一套 |
0.5ml/1.5ml/10ml/50ml 四面离心管架 |
一套 |
无核酸酶的蒸馏水 |
一瓶 |
无核酸酶的生理盐水 |
一瓶 |
无水乙醇 |
两瓶 |
无核酸酶带滤芯吸头(10μl/200μl/1000μl) |
各一盒 |
一次性PE手套或者无粉乳胶手套 |
若干 |
一次性口罩 |
若干 |
酒精棉球 |
若干 |
75%酒精消毒喷雾 |
一瓶 |
油性记号笔 |
一支 |
采样拭子 |
若干 |
手术剪 |
一把 |
镊子 |
两把 |
无菌注射器 |
若干 |
医用托盘 |
一个 |
酒精灯 |
一个 |
实验服 |
若干套 |
一次性PE手套或者无粉乳胶手套 |
若干 |
一次性口罩 |
若干 |
一次性帽子 |
若干 |
鞋套 |
若干 |